Introducción
⌅El garbanzo (Cicer arietinum L.) se sitúa como la quinta leguminosa de importancia a nivel mundial,
siendo fuente de proteínas, minerales y vitaminas para la alimentación
humana y animal (11. Chandana BS, Mahto RK, Singh RK, Ford R, Vaghefi N, Gupta SK, et al.
Epigenomics as potential tools for enhancing magnitude of breeding
approaches for developing climate resilient chickpea. Genetista frontal.
2022; 13: 900253. https://doi.org/10.3389/fgene.2022.900253
). Los principales países productores son India (7
504 327,99 millones de toneladas), Türkiye (570 327,1 mil toneladas) y
Australia (509 213,9 mil toneladas), entre otros (22. FAOSTAT. Base de datos estadística. Food and Agriculture Organization of the United Nations. 2023. Disponible en: https://www.fao.org/faostat/es/#data/QCL/visualize [Acceso 26 agosto 2025].
).
En
Cuba, para satisfacer el consumo del garbanzo por la población, se
realizan importaciones originarias, en su mayoría, de México, Canadá y
España (33.
Vargas-Blandino D, Cárdenas-Travieso RM. Cultivo del garbanzo, una
posible solución frente al cambio climático. Cultivos Tropicales. 2021;
42, (1):1-12.
).
Las enfermedades constituyen
una de las causas más importantes de la reducción de los rendimientos
agrícolas del garbanzo a nivel mundial. Entre estas se encuentran las
ocasionadas por hongos patógenos del suelo como Fusarium spp., Sclerotium rolfsii Sacc., Rhizoctonia solani Kühn y Macrophomina phaseolina (Tassi) Goid, encontrándose, con mayor incidencia, especies pertenecientes al género Fusarium, las cuales provocan síntomas de pudrición de la raíz y marchitez vascular (44.
Razzakova N, Bababekov K, Gulmurodov R, Rakhmonov J. Fungal diseases of
chickpeas in irrigated and rainfall areas of Uzbekistan and their
control measures. E3S Web of Conferences. 2024; 563 (03005): 1-6. https://doi.org/10.1051/e3sconf/202456303005
).
La clasificación taxonómica de Fusarium ha sido ampliamente investigada, teniendo en consideración caracteres
morfológicos como forma, tamaño y septación de conidios, tipo de
conidióforo y células conidiógenas y presencia o ausencia de
clamidosporas. En diversos casos, estas características resultan ser
insuficientes para una correcta identificación a nivel de especie,
debido a la similaridad de las estructuras, resultando necesaria la
implementación de técnicas moleculares (55. Duarte Y, Martínez B, Echevarría A, Santos do Carmo de Souza E, N.G. Miller R, Café-Filho AC. Primer informe de Fusarium incarnatum (Desm.) Sacc. afectando al cultivo del garbanzo en Cuba. Rev. Protección Veg. 2022; 37(2):1-7.
).
La
identificación molecular, mediante la extracción de ADN y la
secuenciación de genes informativos, complementa las insuficiencias de
la identificación morfológica. Estas herramientas posibilitan el cálculo
de índices de variabilidad genética dentro de una población y
establecen diferencias entre genotipos de las especies de Fusarium (66. O’Donnell K, Whitaker BK, Laraba I, Proctor RH, Brown DW, Broders K, et al. DNA sequence-based identification of Fusarium: A work in progress. Plant Disease 2022; 106:1597-1609. https://doi.org/10.1094/PDIS-09-21-2035-SR
).
La secuenciación de genes, permitió que numerosos autores identifiquen diferentes clados dentro del complejo de especies de Fusarium oxysporum Schlechtendahl emend. Snyder & Hansen (FOSC), utilizando diferentes
regiones génicas como el factor de elongación de la traducción 1α (tef-1α), la segunda subunidad mayor de la ARN polimerasa II (rpb2), beta-tubulina (tub2), actina (act1), calmodulina (CaM) e histona (h3), entre otros (77. Ujat AH, Vadamalai G, Hattori Y, Nakashima C, Wong CKF, Zulperi D. Current classification and diversity of Fusarium species complex, the causal pathogen of Fusarium wilt disease of banana in Malaysia. Agronomy. 2021; 11:1955. https://doi.org/10.3390/agronomy11101955
). El tef-1α es uno de los marcadores de elección más confiables a nivel de especie, debido a que es altamente informativo para Fusarium spp., con alto nivel de polimorfismo entre especies estrechamente
relacionadas. Se desarrolló, por primera vez, para investigar el linaje
complejo de especies de Fusarium oxysporum (FOSC), grupo de cepas patógenas de importancia económica, morfológicamente similares, pero filogenéticamente distintas (88.
O’Donnell K, Kistler HC, Cigelnik E, Ploetz RC. Multiple evolutionary
origins of the fungus by gene relocation during evolution of the causing
Panama disease of banana: Concordant evidence from nuclear and
mitochondrial gene genealogies. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1998;
95:2044-2049. https://doi.org/10.1073/pnas.95.5.2044
).
El manejo de este agente fitopatógeno en
campo, se realiza con la aplicación de medidas preventivas y/o productos
químicos. El uso excesivo de estos productos ha ocasionado
contaminación ambiental, de suelos y de fuentes de agua, provocando
daños a la salud humana y animal. Debido al impacto negativo de los
plaguicidas sintéticos, se hizo necesaria la implementación de nuevas
alternativas, como el uso de los biocontroladores que limitan el
desarrollo de los fitopatógenos (99. López-López ME, Del Toro Sánchez CL, Gutiérrez-Lomelí M, Ochoa Ascencio S, Aguilar-López JA, Robles García MA, et al. Aislamiento y caracterización de Trichoderma spp. para actividad antagónica contra patógenos del fruto del aguacate (Persea americana Mill). Rev. Horticultura. 2022; 8(8): 714. https://doi.org/10.3390/horticulturae8080714
).
En la actualidad, diversas especies pertenecientes al género Trichoderma son ampliamente utilizadas para el control de enfermedades en plantas,
pues poseen la capacidad de producir enzimas hidrolíticas, competencia
por espacio y nutrientes, la antibiosis y el micoparasitismo, inducción
de mecanismos de defensa fisiológicos y bioquímicos en las plantas, así
como la promoción del crecimiento vegetal (1010. Yao X, Guo H, Zhang K, Zhao M, Ruan J, Chen J. Trichoderma and its role in biological control of plant fungal and nematode disease. Front Microbiol. 2023; 14:1160551. https://doi.org/10.3389/fmicb.2023.1160551
, 1111. Ramzan U, Abid K, Zafar MA, Anwar AM, Nadeem M, Tanveer U, et al. Trichoderma: multitalented biocontrol agent. Int J Agri Biosci; 2023. 12(2): 77-82. https://doi.org/10.47278/journal.ijab/2023.047
).
El presente trabajo tuvo como objetivos identificar, a nivel de especie, tres aislados de Fusarium spp. procedentes de plantas de C. arietinum y la selección in vitro de aislamientos de Trichoderma sp. para su biocontrol.
Materiales y Métodos
⌅El experimento se realizó en el Laboratorio de Micología Vegetal (LMV) del Centro Nacional de Sanidad Agropecuaria (CENSA), en el municipio San José de las Lajas, provincia Mayabeque, Cuba.
Identificación molecular de aislamientos de Fusarium spp.
⌅Se estudiaron aislamientos de Fusarium spp., procedentes de plantas de C. arietinum,
pertenecientes a la Colección de cultivos microbianos del LMV del
CENSA. Los aislados se sembraron en placas Petri de 90 mm de diámetro
(Ø) que contenían 15 ml de medio de cultivo Papa Dextrosa Agar (PDA;
Biocen). Las placas inoculadas con los aislados se sellaron con papel
parafilm e incubaron (incubadora Friocell) a 25 ± 2°C y oscuridad
constante, durante siete días. El ADN se extrajo por el método CTAB
(cetyl trimethyl-ammonium bromide) (1212. Doyle JJ, Doyle JL. Isolation of plant DNA from fresh tissue. Focus. 1990; 12:13-15.
).
La calidad del ADN extraído se analizó mediante una electroforesis en
gel de agarosa al 1 %, teñido con bromuro de etidio en tampón TAE 1×, y
se visualizó, bajo luz ultravioleta, para comprobar la concentración.
Seguidamente, el ADN se diluyó hasta una concentración final de 50 ng de
ADN/µl en agua destilada.
Para la amplificación del gen que codifica para el factor de elongación y traducción 1α (tef-1α),
se utilizaron los cebadores: EF1 (ATGGGTAAGGAGGACAAGAC) y EF2
(GGAAGTACCAGTGATCATGTT) (8). Las reacciones de amplificación se
ajustaron a un volumen final de 25 µl con 1,5 mM de MgCl2;
0,2 µM de desoxinucleótidos trifosfato (dNTP’s); 0,4 µM para cada
cebador; 0,5 U de Taq DNA polimerasa (Roche CustomBiotech, USA); 10
ng/µl de ADN genómico de cada aislado y agua libre de nucleasa para
completar el volumen total. El programa de amplificación (55. Duarte Y, Martínez B, Echevarría A, Santos do Carmo de Souza E, N.G. Miller R, Café-Filho AC. Primer informe de Fusarium incarnatum (Desm.) Sacc. afectando al cultivo del garbanzo en Cuba. Rev. Protección Veg. 2022; 37(2):1-7.
) para la PCR se realizó en el termociclador ESCO (Swift.MaxPro, USA).
Los productos de PCR se analizaron mediante electroforesis en geles de agarosa al 1 %, teñidos con bromuro de etidio en tampón TAE 1×, y se visualizaron bajo luz ultravioleta para comprobar el tamaño y la pureza de la amplificación. El tamaño de cada producto obtenido se determinó por comparación con los marcadores de peso molecular de 1 kb Plus Ladder y de 100 pb Low DNA Mass Ladder (Invitrogen Life Technologies, USA).
Los fragmentos amplificados se procesaron con fosfatasa alcalina de camarón (rSAP) y ExoSAP-IT® (USB, USA), según las indicaciones del fabricante. Posteriormente, se secuenciaron en ambas direcciones, con sus respectivos cebadores específicos, realizado en ACTGene, Análisis Moleculares Ltda (Porto Alegre, RS, Brasil).
Para la edición de las secuencias obtenidas, se utilizaron los programas BioEdit Sequence Alignment Editor v7.2.5 (1313.
Hall TA. Bioedit: a user-friendly biological sequence alignment editor
and analysis program for Windows 95/98/NT. Nucl. Acids. Symp. Ser.1999;
41:95-98.
), y Lasergene SeqMan v7.0.0 (DNAStar,
Madison, USA). La identificación se llevó a cabo por comparación entre
las secuencias consenso obtenidas, y las secuencias homólogas
depositadas en la base de datos del GenBank del Centro Nacional de
Información Biotecnológica (NCBI) con el uso de la Herramienta Básica de
Alineamiento Local (BLAST) (https://blast.ncbi.nlm.nih.gov). Las secuencias obtenidas de los tres aislados de Fusarium se depositaron en la base de datos del GenBank.
Para
comprobar la similitud de los aislamientos estudiados se realizó un
alineamiento de las secuencias génicas con el programa múltiple de
secuencias ClustalW, software MEGA v7.0.14 (1414.
Kumar S, Stecher G, Tamura K. MEGA7: Molecular evolutionary genetics
analysis version 7.0 for bigger datasets. Molecular Biology and
Evolution. 2016; 33: 1870-1874.
). Se utilizaron secuencias accesibles provenientes del NCBI. Las secuencias de F. oxysporum a partir de tef-1α (No. acceso JF740777) (1515. O'Donnell K, Humber RA, Geiser DM, Kang S, Park B, Robert VA et al.
Phylogenetic diversity of insecticolous fusaria inferred from
multilocus DNA sequence data and their molecular identification via
FUSARIUM-ID and Fusarium MLST. Mycologia. 2012; 104(2):427-45. https://doi.org/10.3852/11-179
), y de F. oxysporum (No. acceso GU170541) (1616.
Migheli Q, Balmas V, Harak H, Sanna S, Scherm B, O'Donnell K. Molecular
phylogenetic diversity of dermatologic and other human pathogenic
fusarial isolates from hospitals in northern and central Italy. J Clin
Microbiol. 2010; 48(4):1076-84. https://doi.org/10.1128/JCM.01765-09
), depositadas en la base de datos del GenBank, se
incluyeron como especies de referencia junto con las obtenidas en este
estudio.
Efecto antagónico in vitro de los aislamientos de Trichoderma sp. frente a tres aislados de F. oxysporum
⌅La investigación se desarrolló con ocho aislamientos de Trichoderma sp. denominadas (T 1.1; T 5.6; T 6.2; T 7.2; T 7.5; T 8.1; T 10.4 y T 11.1) provenientes del Centro de Investigaciones Agropecuarias, Facultad de Ciencias Agropecuarias, Universidad Central “Marta Abreu” de Las Villas. Los aislados de Fusarium spp. (Fo.1; Fo.2 y Fo.3) utilizados, pertenecen a la Colección de cultivos microbianos del LMV del CENSA.
Se evaluaron dos modos de acción (antibiosis y competencia por espacio) de los aislamientos de Trichoderma sp. frente a Fusarium spp., utilizando el método de cultivo dual (CD) descrito por Martínez y Solano (1717. Martínez B, Solano T. Antagonismo de Trichoderma spp. frente a Alternaria solani (Ellis y Martin) Jones y Grout. Rev. Protección Veg. 1995; 10(3): 221-225.
).
Para el montaje del CD, los aislamientos de Trichoderma sp. se sembraron en medio de cultivo Agar Malta (BioCen) y se incubaron (incubadora Friocell) a 28 ± 2°C y oscuridad constante, durante tres días. Los aislados de Fusarium (Fo.1; Fo. 2 y Fo.3) se mantuvieron en medio de cultivo PDA (BioCen), incubados (incubadora Friocell) a 25 ± 2°C y oscuridad constante durante siete días.
El CD se llevó a cabo en placas Petri (Ø = 90 mm) contentiva de 15 ml del medio de cultivo PDA, incubadas (incubadora Friocell) a 25 ± 2°C y oscuridad constante. Se utilizaron discos (Ø = 6 mm) de la periferia de las colonias de ambos hongos, sembrados diametralmente opuestos uno del otro, a una distancia de 5 mm del borde. Se incluyó un control de los aislados del fitopatógeno sin el antagonista. Se realizaron tres réplicas por cada tratamiento.
Antibiosis
⌅Se evaluó por el crecimiento micelial de los aislados de Fusarium spp. en el CD antes del momento de contacto físico entre ambos hongos (Trichoderma sp. - Fusarium spp.) a las 48 h, respecto a su correspondiente testigo (Fusarium spp.).
Competencia por espacio
⌅El efecto antagónico se determinó mediante la escala de grados de Bell et al. (1818. Bell DK, Wells HD, Markam CR. In vitro antagonism of Trichoderma spp. against six fungal pathogens. Phytopathology. 1982; 72:379-382.
).
Las evaluaciones se realizaron a las 24, 48, 72 y 96 horas, midiendo el
crecimiento micelial lineal de ambos hongos con una regla graduada,
hasta que uno de los dos completara el área total de la placa.
Se evaluó el Porcentaje de Inhibición del Crecimiento Radial (PICR) a las 96 h, con el empleo de la fórmula de Samaniego et al. (1919. Samaniego G, Ulloa S, Herrera S. Hongos del suelo antagonistas de Phymatotrichum omnivorum. Rev. Mex. Fitopatología. 1989; 8:86-95.
): PICR=[(R1-R2)/R1]*100
donde:
Los
datos obtenidos se procesaron mediante Análisis de Varianza de
clasificación simple y las medias se compararon según la Dócima de
Rangos Múltiples de Duncan (p ≤ 0,05), utilizando el paquete Estadístico InfoStat Profesional (2020. Di Rienzo J, Balzarini M, González L, Tablada M, Guzmán W, Robledo C, et al. InfoStat Profesional versión 2.1. Universidad Nacional de Córdoba. Argentina. 2016.
).
Resultados y Discusión
⌅Identificación molecular de aislamientos de Fusarium spp.
⌅El producto de la amplificación del ADN genómico de los aislamientos de Fusarium, con los cebadores EF1 y EF2, tuvo un tamaño aproximado de 700 pb, observándose una banda bien definida en todos los casos (Fig.1).
Las secuencias de ADN obtenidas se depositaron en la base de datos del GenBank bajo los números MT163654 (Fo.1), MT163657 (Fo.2) y MT185672 (Fo.3). El análisis del BLAST indicó que las secuencias de los tres aislados tienen 100 % de similaridad con F. oxysporum (100 % de identidad con JF740777, GU170541) (1515. O'Donnell K, Humber RA, Geiser DM, Kang S, Park B, Robert VA et al.
Phylogenetic diversity of insecticolous fusaria inferred from
multilocus DNA sequence data and their molecular identification via
FUSARIUM-ID and Fusarium MLST. Mycologia. 2012; 104(2):427-45. https://doi.org/10.3852/11-179
, 1616.
Migheli Q, Balmas V, Harak H, Sanna S, Scherm B, O'Donnell K. Molecular
phylogenetic diversity of dermatologic and other human pathogenic
fusarial isolates from hospitals in northern and central Italy. J Clin
Microbiol. 2010; 48(4):1076-84. https://doi.org/10.1128/JCM.01765-09
).
En un estudio similar, Moparthi et al. (2121. Moparthi S, Perez-Hernandez O, Burrows ME, Bradshaw MJ, Bugingo C, Brelsford M, et al. Identification of Fusarium spp. associated with chickpea root rot in Montana. Agriculture. 2024; 14, 974. https://doi.org/10.3390/agriculture14070974
), comunicaron la presencia de diferentes especies de Fusarium asociadas al garbanzo en Montana. Se encontró a F. oxysporum como la especie más prevalente (33 %), seguida de Fusarium acuminatum Ellis & Everh. (21 %), Fusarium avenaceum (Fr.) Sacc. (15 %), Fusarium redolens Wollenw. (14 %), Fusarium culmorum (Wm. G. Sm.) Sacc. (6 %), Fusarium sporotrichioides Sherb. (6 %), Neocosmospora solani (Mart.) L. Lombard & Crous (6 %), entre otros.
Valadez-Moctezuma et al. (2222. Valadez-Moctezuma E, Samir S, Rangel-Castillo AE, García-Cariño J, Juárez-Campos K, Vázquez-Reyes A, et al. Fusarium species complexes associated with chickpea wilt and stem and root rot in wheat. Acta Biológica Colombiana. 2025; 30 (3): 172. https://doi.org/10.15446/abc.v30n2.108995
), lograron identificar, en orden de frecuencia, a F. oxysporum (87,6 %), Fusarium equiseti (Corda) Sacc. (4,7 %), Fusarium solani Mart. Sacc. (4,7 %), Fusarium proliferatum (Matsush.) Nirenberg ex Gerlach & Nirenberg. (1,5 %) y Fusarium sp. (1,5 %) en el garbanzo. Por otra parte, Duarte et al. (55. Duarte Y, Martínez B, Echevarría A, Santos do Carmo de Souza E, N.G. Miller R, Café-Filho AC. Primer informe de Fusarium incarnatum (Desm.) Sacc. afectando al cultivo del garbanzo en Cuba. Rev. Protección Veg. 2022; 37(2):1-7.
), notificaron la detección de Fusarium incarnatum (Desm.) Sacc. en garbanzo, mediante el uso del gen tef-1α.
Efecto antagónico in vitro de los aislamientos de Trichoderma sp. frente a tres aislamientos de F. oxysporum
⌅Antibiosis
⌅A partir de las 48 h, antes del contacto físico entre ambos hongos, los ocho aislamientos de Trichoderma sp. evaluados, inhibieron el crecimiento de los aislados de F. oxysporum, en comparación con los controles. Los aislamientos T 7.5 y T 10.4 provocaron el mayor efecto inhibitorio frente a Fo.1 y Fo.2, en comparación con el control del fitopatógeno, sin diferencias con los restantes aislamientos de Trichoderma sp. (Fig. 2).
El desarrollo micelial del aislado Fo.3, disminuyó por la acción del aislamiento T 11.1, sin diferencias con T 5.6; T 7.2; T 7.5 y T 10.4 (Fig. 2), pero si con los restantes aislamientos, en comparación con el control.
La producción de compuestos volátiles, por las cepas de Trichoderma, con la capacidad de inhibir, significativamente, el crecimiento de F. oxysporum fue notificada por diversos autores (2323.
Rajani P, Rajasekaran C, Vasanthakumari MM, Olsson SB, Ravikanth G,
Shaanker RU. Inhibition of plant pathogenic fungi by endophytic Trichoderma spp. through mycoparasitism and volatile organic compounds. Microbiol. Res. 2021;242: 126595. https://doi.org/10.1016/j.micres.2020.126595
, 2424. Belén M, Monti MM, Gualtieri L, Ruocco M, Hermosa R, Monte E. Trichoderma harzianum Volatile Organic Compounds Regulated by the THCTF1 Transcription Factor
Are Involved in Antifungal Activity and Beneficial Plant Responses. J.
Fungi. 2023; 9(6): 654. https://doi.org/10.3390/jof9060654
).
Brizuela et al. (2525. Brizuela AM, Gálvez L, Arroyo JM, Sánchez S, Palmero D. Evaluation of Trichoderma spp. on Fusarium oxysporum f. sp. asparagi and Fusarium wilt Control in Asparagus Crop. Plants. 2023;12:2846. https://doi.org/10.3390/plants12152846
), observaron resultados similares con la inhibición del crecimiento micelial de aislamientos de F. oxysporum f. sp. asparagi, patógeno del espárrago (Asparagus officinalis L.), al enfrentarlo con cepas de Trichoderma atroviride P. Karst. Bidr. Känn. Finl. Nat. Folk., Trichoderma asperellum Samuels, Lieckfeldt & Nirenberg, y Trichoderma saturnisporum Hammill. Por su parte, Correa-Delgado et al. (2626. Correa-Delgado R, Brito-López P, Cardoza RE, Jaizme Vega MC, Laich F, Gutiérrez S. Biocontrol potential of a native Trichoderma collection against Fusarium oxysporum f. sp. cubense subtropical race 4. Agriculture. 2024; 14, 2016: 1-22. https://doi.org/10.3390/agriculture14112016
), informaron la inhibición de Fusarium oxysporum f. sp. cubense (Foc-STR4) en presencia de Trichoderma atrobrunneum F.B. Rocha, P. Chaverri & Jaklitsch y Trichoderma guizhouense Q.R. Li, McKenzie & Yong Wang bis. De igual forma, Martínez et al. (2727. Martínez-Coca B, Infante D, Caraballo W, Duarte-Leal Y, Echevarría-Hernández A. Antagonismo de cepas de Trichoderma asperellum Samuels, Lieckfeldt & Nirenberg frente a aislamientos de Fusarium spp. procedentes de garbanzo. Rev. Protección Veg. 2018; 33(2): 1-13.
), informaron los mayores valores de inhibición del desarrollo micelial lineal de Fusarium oxysporum Schlechtend.: Fr. f. sp. ciceris (Padwik) Matuo & K. Sato al ser enfrentado con cepas de T. asperellum.
Competencia por espacio
⌅Se observó un crecimiento rápido de los aislamientos de Trichoderma sp., en comparación con los aislados de F. oxysporum,
disminuyendo el área de crecimiento y compitiendo por los nutrientes.
Estos resultados coinciden con lo notificado por Mohiddin et al. (2828. Mohiddin FA, Padder SA, Bhat AH, Ahanger MA, Shikari AB, Wani SH, et al. Phylogeny and optimization of Trichoderma harzianum for chitinase production: evaluation of their antifungal behaviour
against the prominent soil borne Phyto-pathogens of temperate India.
Microorganisms. 2021; 9(9),1962. https://doi.org/10.3390/microorganisms9091962
), al enfrentar aislados de Trichoderma harzianum Rifai contra F. oxysporum, Dematophora necatrix R. Hartig y Pythium aphanidermatum (Edson) Fitzp.
Los ocho aislamientos de Trichoderma sp. evaluados se ubicaron en la clase 1 de la escala de Bell et al. (1818. Bell DK, Wells HD, Markam CR. In vitro antagonism of Trichoderma spp. against six fungal pathogens. Phytopathology. 1982; 72:379-382.
). Martínez et al. (2727. Martínez-Coca B, Infante D, Caraballo W, Duarte-Leal Y, Echevarría-Hernández A. Antagonismo de cepas de Trichoderma asperellum Samuels, Lieckfeldt & Nirenberg frente a aislamientos de Fusarium spp. procedentes de garbanzo. Rev. Protección Veg. 2018; 33(2): 1-13.
) y Duarte et al. (55. Duarte Y, Martínez B, Echevarría A, Santos do Carmo de Souza E, N.G. Miller R, Café-Filho AC. Primer informe de Fusarium incarnatum (Desm.) Sacc. afectando al cultivo del garbanzo en Cuba. Rev. Protección Veg. 2022; 37(2):1-7.
), obtuvieron resultados similares cuando estudiaron cepas de T. asperellum, que se ubicaron en la clase 1 de la escala de Bell, cuando se les enfrentó con aislamientos de Fusarium spp. de garbanzo y frijol.
En el análisis del PICR se detectó que los aislamientos T 10.4 y T 11.1, presentaron los mayores porcentajes de inhibición con valores de 51,19 % y 49,4 %, respectivamente, para Fo.1, con diferencias con el resto de los aislamientos de Trichoderma sp. (Fig. 3 y 4). Frente a Fo.2, se destacaron los aislados antes mencionados (T 10.4 y T 11.1) con valores de inhibición de 50,62 % y 46,91 %, respectivamente, con diferencias significativas respecto a los demás (Fig. 3 y 4).
Los aislamientos T 10.4 (53,7 %) y T 11.1 (51,85 %), sin diferencias con T 7.5 (43,21 %) presentaron los mayores PICR frente al aislado Fo.3 (Fig. 3 y 4).
Correa-Delgado et al. (2626. Correa-Delgado R, Brito-López P, Cardoza RE, Jaizme Vega MC, Laich F, Gutiérrez S. Biocontrol potential of a native Trichoderma collection against Fusarium oxysporum f. sp. cubense subtropical race 4. Agriculture. 2024; 14, 2016: 1-22. https://doi.org/10.3390/agriculture14112016
), confirmaron el potencial, como antagonista, de T. atrobrunneum (TF01: 46,66 %; TF02, TF04, TF06: 43,33 %) y T. guizhouense (TF14: 43,33 %) frente a Fusarium oxysporum f. sp. cubense. Chen et al. (2929. Chen J, Zhou L, Din IU, Arafat Y, Li Q, Wang J, et al. Antagonistic activity of Trichoderma spp. against Fusarium oxysporum in rhizosphere of radix pseudostellariae triggers the expression of
host defense genes and improves Its growth under long-term monoculture
system. System. Front. Microbiol. 2021; 12:579920. https://doi.org/10.3389/fmicb.2021.579920
) obtuvieron porcentajes de inhibición de dos cepas de Trichoderma sp. (ZC5 y ZC51) frente a F. oxysporum con 47,91 % y 47,66 %, respectivamente.
Katyayani et al. (3030. Katyayani KKS, Bindal S, Prakash Singh J, Rana M, Srivastava S. In vitro evaluation of Trichoderma spp. against chickpea wilt. International Archive of Applied Sciences and Technology. 2020; 11(3): 1-4. https://doi.org/10.15515/iaast.0976-4828.11.3.14
), evaluaron el efecto inhibidor de T. harzianum, Trichoderma viride Pers. y Trichoderma koningii Oudem sobre Fusarium oxysporum f. sp. ciceri, concluyendo que a T. koningii fue la especie de mayor eficiencia en la inhibición del crecimiento micelial del patógeno.
Conclusiones
⌅Los resultados de este estudio permitieron la identificación molecular de los tres aislamientos (Fo.1, Fo.2 y Fo.3) como F. oxysporum.
Del análisis integral de los mecanismos de acción estudiados in vitro, los aislamientos T 7.5, T 10.4 y T 11.1 fueron los más promisorios para el biocontrol de F. oxysporum.